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        免疫共沉淀(CO-IP)/CO-IP/免疫共沉淀

        型    號:
        更新時間: 2017-08-03

        免疫共沉淀(CO-IP)/CO-IP/免疫共沉淀
        以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相互作用的經典方法,當細胞在非變性條件下被裂解時,完整細胞內存在的許多蛋白質-蛋白質間的相互作用被保留了下來。如果用蛋白質x的抗體免疫沉淀x,那么與x在體內結合的蛋白質y也能沉淀下來。

        產品介紹:

         

        免疫共沉淀

        服務目的:

        測定兩種目的蛋白質是否在細胞內結合;也可用于測定確定某種特定蛋白質的新的作用搭檔。
        服務原理:

        以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相互作用的經典方法,當細胞在非變性條件下被裂解時,完整細胞內存在的許多蛋白質-蛋白質間的相互作用被保留了下來。如果用蛋白質x的抗體免疫沉淀x,那么與x在體內結合的蛋白質y也能沉淀下來。
        服務材料:
        試劑:蛋白提取試劑盒、非離子變性劑(NP-40、TritonX-100)、PBS、TBS、相應的IgG、Protein A 或Protein G瓊脂糖凝膠珠、SDS-PAGE電泳、上樣緩沖液。
        儀器:振蕩器、蛋白電泳儀、恒溫箱、脫色搖床。

        服務流程:
        1)用其特定蛋白的抗體與ProteinA/G相結合(Flag IP Kit已結合上);
        2)用抗體成點特定蛋白,特定蛋白已結合了與其相互作用蛋白;
        3)通過洗滌得到純復合蛋白后用感興趣蛋白抗體通過WB方法檢測其IP結果;
        4)提交WB圖與分析結果和實驗報告。
        服務方法:
        1、蛋白樣品準備。收集細胞或組織,在非變性條件下裂解細胞,釋放蛋白。
        2、選做去除非特異性結合。取待測樣品,選用和免疫共沉淀時使用的IgG種屬相同的普通IgG與瓊脂糖凝膠珠混合,4oC慢搖30min-2h。離心取上清。
        3、免疫共沉淀。加一抗,4oC慢搖過夜。加瓊脂糖凝膠珠,4oC慢搖1~3h。瞬時離心棄上清。PBS洗沉淀5次。
        4、加電泳上樣緩沖液,煮沸用于SDS-PAGE電泳。

         

        收費標準/服務周期/提供結果:
        詳談,我們會根據您的方案及需求制定詳細的服務協議。

        【本公司合作項目】
        慢病毒,腺病毒,RNAi類,分子生物實驗,病理實驗,免疫學實驗,細胞實驗,動物實驗,蛋白組學實驗等,能夠進行藥效學評價、毒理學評價、細胞藥篩、動物建模、病理檢測、蛋白組學、代謝組學、高通量測序、ChIP、CO-IP、生物信息學分析服務!

        詳情請咨詢:

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